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免疫沉淀结果的解读

免疫沉淀:利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。

其中Flag、HA为蛋白质标签(还有很多其他的蛋白质标签:https://baijiahao.baidu.com/s?id=1747078276051096597&wfr=spider&for=pc),抗体可以通过与蛋白质标签特异性结合对蛋白质进行纯化。

IP:HA? 表示利用HA的抗体进行蛋白质富集

input??? 表示阳性对照(未经过抗体特异性反应进行富集的蛋白质混合物)

免疫沉淀结果的解读,第1张
文献Acetyltransferase from Akkermansia muciniphila blunts colorectal tumourigenesis by reprogramming tumour microenvironment中图5E

图片解读:

input部分(图片的阳性对照部分):

Actin为western plot的对照(通过与其他蛋白的条带大小比对可以判断是否发生富集还是发生了降低)

HA和Flag为其标记的蛋白质

IP:HA部分(图片的结果部分):

最左侧条带,通过HA抗体富集之后,由于包含HA标签,因此能够获得HA标记的蛋白条带;

中间条带(发挥阴性对照的作用),通过HA抗体富集之后,由于没有HA标记的蛋白,因此无条带;

最右侧条带,通过HA抗体富集之后,如果条带包含Flag,则表明Flag标记的蛋白和HA标记的蛋白结合,导致在富集HA时Flag标记的蛋白同时被富集;如果条带不包含Flag,则表明Flag标记的蛋白和HA标记的蛋白未发生结合,因而Flag标记的蛋白无法在富集HA时被富集。


https://www.xamrdz.com/lan/5q71994479.html

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